Treni maalum ambayo inaendesha kutoka Antarctica hadi msitu inaweza kukomesha kuwapo, na sababu ni kwa sababu ya kuzorota kwa nyimbo za reli. Wanyama, wanaogopa kupoteza usafirishaji pekee ambao unawaruhusu kusafiri, walimgeukia Diego kwa msaada huko Go Diego Go! Uokoaji wa reli ya Diego. Mvulana yuko tayari kusaidia, akikushirikisha katika utekelezaji wa mpango wake. Inajumuisha kukarabati barabara, lakini kwanza unahitaji kuweka wanyama wote kwenye gari. Abiria wanakubali kusafiri tu katika kampuni ya aina yao, kwa hivyo kuna gari tofauti kwa penguins, kulungu, huzaa, na kadhalika. Wakati wanyama wote wamewekwa, treni itaanza safari yake na kabla ya kila kituo lazima kukusanyika barabara kama puzzle kwa kugeuza sehemu za kibinafsi katika Go Diego Go! Uokoaji wa reli ya Diego.
